案例内容
【案情简介】
潘文（化名）称，潘仔萱（化名）是其与周丹丹（化名）的亲生女，周丹丹于2019年1月20日去世，周会宇（化名）和吴亮英（化名）系周丹丹的父母。为给潘仔萱办理户口迁移，需要周会宇、吴亮英与潘仔萱之间亲缘关系的证明材料，故潘文、周会宇、吴亮英一同委托我所，对周会宇、吴亮英是否为潘仔萱的生物学外祖父母进行鉴定。
【鉴定过程】
1、线粒体DNA高变区的测序 按照GA/T 383-2014《法庭科学DNA实验室检验规范》中的方法，采用Chelex法提取“2021-346-吴亮英”和“2021-346-潘仔萱”的样本DNA，按照SF/Z JD0105008-2018《法医物证鉴定线粒体DNA检验规范》扩增样本线粒体DNA高变区I和高变区II，扩增产物委托北京睿博兴科生物技术有限公司进行纯化和正、反链双向测序，测序结果与修订的剑桥参考序列rCRS进行比对。同时设置阳性对照和阴性对照。测序结果，对照分型正确，样本分型省略。 2、细胞核内DNA的检验 按照GA/T 383-2014《法庭科学DNA实验室检验规范》中的方法进行检验。采用GSTAR? 25和GSTAR? 22 Plus试剂直接扩增上述四人的样本DNA。扩增产物经Applied Biosystems 3500遗传分析仪检测、GeneMapper? ID-X v1.6软件分析，检测各基因座的基因型。用MicroreaderTM 23sp-D ID System试剂复核潘文的分型结果。 检验结果显示，阳性对照分型正确，阴性对照未检见特异性峰，各样本分型省略。
【分析说明】
1、线粒体DNA测序结果分析 线粒体DNA位于细胞核外，呈闭环双链结构，约16.5 Kb，不遵循孟德尔遗传定律，表现为母系遗传，通过卵细胞将其中的遗传信息传递给后代。因此，母亲会把她的线粒体DNA遗传给她的后代，外祖母和外孙女之间拥有相同的线粒体DNA分型。 分析吴亮英和潘仔萱的线粒体DNA高变区I和高变区II的测序结果，两人序列相同，不排除她们来自同一母系。 2、细胞核内DNA的检验 本次鉴定使用43个常染色体STR遗传标记的检验结果进行分析，采用中国群体遗传学资料进行统计计算，遗传标记的累积平均非祖父母排除率为1-1.8926×10-11。 祖孙关系鉴定系隔代亲权鉴定，在常染色体遗传标记上，根据孟德尔遗传定律，孩子与亲生父母各方必定有一个等位基因同源。因此，第三代（孙）个体必定有一个等位基因源自其祖父母。 分析潘文和潘仔萱的DNA检验结果，在每一个常染色体STR基因座上，他们之间至少有一个等位基因是相同的，这种表现符合遗传规律。按照GB/T 37223-2018《亲权鉴定技术规范》中亲权指数的计算方法和亲子关系判定规则，计算上述43个常染色体STR基因座的累计亲权指数为7.9982×1020，该检验结果支持潘文是潘仔萱的生物学父亲，不支持其他随机个体是潘仔萱的生物学父亲。 分析周会宇、吴亮英、潘文和潘仔萱的DNA检验结果，在43个常染色体STR基因座上，潘仔萱的一对等位基因中的一个可以从潘文的基因型中找到来源，另一个可以从周会宇或吴亮英的基因型中找到来源，这种表现符合遗传规律。参照SF/Z JD0105005-2015《生物学祖孙关系鉴定规范》中祖孙关系指数的计算方法和判定规则，计算上述43个常染色体STR基因座的累积祖孙关系指数为5.5125×1012，该检验结果支持周会宇、吴亮英是潘仔萱的生物学外祖父母，不支持其他随机个体是潘仔萱的生物学外祖父母。 综合线粒体DNA测序结果和细胞核内DNA的检验结果，支持周会宇、吴亮英是潘仔萱的生物学外祖父母。
【鉴定意见】
检验结果支持周会宇、吴亮英是潘仔萱的生物学外祖父母。
